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抖化学 / 2022-11-05

溶剂贮槽

  溶剂贮槽应具有250毫升的容量,”最好配有干燥管以防止溶 剂从大气中吸水。贮槽可用玻璃或不锈钢制成,但如用玻璃的则 应为琥珀色,以防止吸收紫外线而引起氯代烃的分解。
溶剂泵
  溶剂泵有两种类型一一注射型或振动隔膜或活塞型。后一种 类型较好,因其在更换溶剂时易于清洗,从而减少了溶剂的消 耗。
  隔膜或活塞型泵还可在泵前低压产生梯度,而且可对梯度系 统使用任何种数的溶剂。另方面,注射泵类则每种溶剂就要求有 个泵。活塞或隔膜型阀的泵容量应为100~200微升,并在入口 压力高达35兆牛顿/米²(5000磅/英寸²)时提供0.1到10毫升/分
的流 速。为了制备工作而使用大口径柱子时,泵只须产生14兆牛 顿/米²(2000磅/英寸²)的压力,但需提供高达100~ 150毫升/ 分的流 速。
注样装置
  基本上有两种类型的注样系统一注射 器或样品阀。注射器 采用一个橡皮隔膜,可工作于高达14兆牛顿/米² (2000磅/英 寸²), 并可用来直接注入填充物内,这样可以得到最高的柱效。 但此方法有可能扰乱填充物顶部,所以常在填充物顶部放置- -块
多孔 的烧结材料,样品即注在此烧结材料上。这种注样方法提供 重现性较好的结果,但效率稍低。可 得到能工作于高达42兆牛 顿/米 (6000磅/英寸²)的进样阀。这类进样阀更易于操作,与 样品注射在多孔烧结料上产生相同的理论塔板数,给出重现性很 好的结果 ,因此对于重复的分析是理想的。

  推荐使用长度100、250或500毫米和外径6.85毫米(1/4英寸) 或更大的色谱柱。这些柱填充了微粒固定相时,在纯分析性分 离和 利用几个毫克溶质的半制备性分离之间提供了良好的折衷。 一根填充了10微米 硅胶 或键合相的250毫米柱,至少应得到5000
理论 塔板,即每米20000理论塔板数。如果采用薄壳填充物,则 应采用较长的柱和更小的直径。例如对于薄壳离子交换介质,通 常采 用内径1.59毫米( 1/16英寸)的1米柱子。
检测器
  对液相色谱法的一般工作有三种 检测器 :紫外检测器、移动 丝检测器和折光率检测器。
单波长或双波长紫外检测器
  这种检测器最常用,具有的最高灵敏度在信噪比2的时候约为 10~8克/毫升。灵敏度变动于10~7和10~9克/毫升之间,取决于所 物质的消光系数。该检测器可用于梯度洗脱,但选择的溶剂只限于 在所采用波长处不具明显UV发色团的那些物质。检测器的缺 是不能检出在UV区没有吸收的物质,因此不能检测出样品中未知 数目的组分或甚至已知共存在的组分。这种检测器是比较便宜 的。
移动丝检测器
  这种检测器体积大、昂贵并最难操作。然而,它能检出柱中 流出的所有非挥发性含碳物质,其响应值大致与溶质的含碳量成 比。其结果是用这一检测器所得到的色谱图,在不同的洗脱溶 质之间给出定量关系的正确效果。当用于梯度洗脱时,任何极性 或任何化学结构的溶剂均可采用,唯一的条件是它们较易挥发。 这种检测器的灵敏度约为10~8克/毫升,因而比UV检测器稍差。
折光仪检测器
  这一检测器是所有LC检测器中灵敏度最低的(约10~5克/毫 升),且只能有效地用于等强度展开的条件。它是三种检测器中 最便 宜的,当前的应用主要限于制备液相色谱。
  上述检测器是最常使用的,全都具有线性响应,能用作定量 分析。填充以微粒固定相的柱子,可提供10000~20000理论塔板 效率一在此情况下, 检测器的死体积极 端重要。如果检测的 体积很大,引起的谱带扩展可能妨碍实现柱子固有的较高效率。
此,建议无论是UV检测器还是折光仪检测器,它们的检测池 体积不应大于8微升,最好更小些(见附录I)。
色谱仪的形式
  色谱仪所取的形式,可为整机式或分开的单个积木组装式。 整机式简单,但是昂贵,且不易装人新的或另外的设备,所以它 有限制的。积木式色谱仪需要一个贮槽、泵、注样头和柱,检 测器及其附属电子设备,还有记录仪。这样一个连结起来的系.
,就是一台非常灵便的色谱仪,使能快速有效地装入不同的或 新的装置。对这种系统的一个谬误的印象是它的组装需要有仪器 造的知识。事实上,只要求化学家连结和拧紧半打的Swege接 头或类似的接头以使之运转。

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